病毒采样管厂家谈济南市47例患者取样部位对核酸检测结果的影响

新型冠状病毒肺炎是由2019-nCo V感染引起的一种急性传染性疾病，确诊标准是在感染者体内发现2019-nCo V的存在。在临床实验室和疾病预防控制中心常规应用实时荧光RT -PC R法检测呼吸道分泌物中病原体，可检测到2019-nCoV基因中某些特定核酸序列的存在，能够作为新型冠状病毒肺炎判定的标准。但也有研究报道2019-nC o V核酸检测阳性率低、个别病例需重复检测多次才确诊的“假阴性的问题。

本研究在检测中发现，第2,3号患者确诊均依据咽拭子检测结果(病例号根据济南市卫生健康委员会公告，而其鼻拭子结果均为阴性，分析认为1月23日正处于济南市新型冠状病毒肺炎疫情早期，患者不易接受鼻拭子采样或本能抗拒反应，亦或是采样人员没有全面掌握操作要领。随后为增加检测的可靠性及敏感性，将鼻拭子与咽拭子放入同一病毒采样管中。第39号患者连续3次鼻咽拭子检测才得以确诊，第I次检测结果为单基因靶标Ct值39.12，根据试剂说明书判阴，但由于该患者有武汉来源史且与确诊病例有密接史，进行第2次采样，结果仍为单基因靶标可疑，没有明显的扩增曲线，后经第3次采样，结果为双基因靶标阳性，这可能与新型冠状病毒肺炎疾病发展的进程有关。2019-nCo V进入人体导致感染后，因不同病程及不同部位细胞受体不同而导致病毒载量不同，其中下呼吸道病毒量明显高于上呼吸道，因此肺泡灌洗液最易检测出病毒核酸，其次是深咳痰，最后是鼻咽部和口咽部拭子。第8号患者分别采用A,B两公司的检测试剂，发现A公司试剂检测结果处于可疑区，而B公司检测结果尽管也处于可疑区，但其扩增曲线呈S形，提示不同公司试剂灵敏度之间的差异，也是导致“假阴性”结果的原因之一。

有研究通过比较2种2019-nC o V核酸检测试剂对255份病例样本检测结果进行分析，发现仅有77.25%的符合率。第24号患者经某医院检测结果为核酸阳性的样本送至我中心进行复核，核酸检测结果显示为可疑，分析认为该样本经2级单位检测，应用检测试剂不同，另外放置4℃时间过长，可能致使2019-nCoV的RNA发生降解，提示新型冠状病毒样本需要严格遵守运输及保存条件。综上分析，在新型冠状病毒肺炎临床检测过程中出现的“假阴性”问题，除与疾病发展过程相关外，与标本采集、标本保存和运输、不同厂家试剂盒等因素均有关。

济南市新型冠状病毒肺炎确诊患者的临床症状主要表现为发热(65.96%)和干咳(14.89%)，远低于武汉市早期99例的主要发热(83%)和咳嗽(82%)症状，低于全国30个省份1099例发热(88.7%)和咳嗽(67.8%)比例，亦低于北京市216例发热(82.1%)和咳嗽(45.8%)表现。济南市新型冠状病毒肺炎患者临床症状中发热及咳嗽比例均较低，可能是导致济南市重症患者占比较低(6.38%)的原因，低于全国报告病例(15.74%) 和北京市(17.6%) 。本研究试图根据不同病例的临床症状及严重程度与2019-nC o V核酸检测结果寻找关联，但由于样本量较少，尚需进一步研究。

本研究结果提示，在2019-nCoV核酸检测过程中，为增加检测的敏感性，防止检测过程“假阴性”结果，采样人员:①应严格遵守标本采集的标准操作程序，采集到含有病毒的细胞。②可将疑似患者同时采集鼻拭子与咽拭子放入同一病毒采样管保存液中。③尽可能采集多个取样部位样本，如鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液、粪便等。④选择具有高灵敏性的检测试剂，或多种检测方法相辅助，如《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》在原有病原学检测的基础上增加了针对新冠病毒特异性IgM和IgG抗体的检测。